生物血清離心機(jī)的使用建議

發(fā)布時間：

2014-08-04

概要：

凝絮物：其產(chǎn)生的原因有多種，不會影響血清本身的品質(zhì)。除非必須減少這些沉淀物，可用離心3000rpm,5min去除，或離心后取上清液加入培養(yǎng)基中一起除菌過濾。

1、血清必須貯存-20℃，如存放于4℃，請勿超過兩周，對于某些單位一次無法用完一瓶，可在無菌條件下將其40-45分裝于無菌50ml離心管中，由于血清解凍時體積會增加10％，必須預(yù)留此膨脹體積的空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。

2、血清一般為200ml和400ml裝量，因此我們建議您在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清：-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時→室溫下全溶后再分裝，一般以50 ml無菌離心管中分裝40-45 ml。強(qiáng)烈建議您在使用過程中，必須規(guī)則地將血清搖晃均勻，小心勿造成氣泡，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由-20℃放置至37℃環(huán)境下解凍，因為溫度改變太大，溶易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而產(chǎn)生沉淀。

3、血清的滅活（heat-inactivation）一般是指56℃，30分鐘水浴加熱已完全解凍的血清，加熱過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。此處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)去活化。但是，經(jīng)過滅活處理的血清會因而造成沉淀的顯著增多，且會影響血清的品質(zhì)。所以，細(xì)胞培養(yǎng)用牛血清不做滅活處理。而診斷試劑用血清在除菌過濾前進(jìn)行過滅活處理。

4、在使用血清的時候，勿將血清留置于37℃太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分會因而受到破壞，影響血清的品質(zhì)。

5、高融合細(xì)胞培養(yǎng)用小牛血清和標(biāo)準(zhǔn)型細(xì)胞培養(yǎng)用小牛血清均需采用100納米濾器連續(xù)三次去除支原體的無菌過濾。若在血清產(chǎn)品中發(fā)現(xiàn)懸浮物，除非必須去除，建議將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。

6、血清的沉淀物
6．1 凝絮物：其產(chǎn)生的原因有多種，但普遍的原因是血清中的脂蛋白（lipoprotein）變形及解凍后血清中存在的纖維蛋白（fibrin）造成，這些凝絮沉淀物不會影響血清本身的品質(zhì)。除非必須減少這些沉淀物，可用離心3000rpm,5min去除，或離心后取上清液加入培養(yǎng)基中一起除菌過濾。

2 顯微鏡下觀察“小黑點”，通常經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認(rèn)為是血清遭受污染，而將血清放置在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但37℃環(huán)境下，又會使此沉淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物的增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點不會影響細(xì)胞的生長。

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